了解定制化侧向流免疫层析的开发_

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定制化侧向流免疫层析的开发

    侧流免疫测定法具有很高的性能，易于使用，而且成本效益高。体外诊断制造商在快速POCT测试中广泛使用这些测定方法，并经常需要为其产品定制组件。

    考虑周到的侧流测定法的设计和开发是实现高性能和低成本的关键，而高性能和低成本在一定程度上有赖于通过选择最佳组件来实现最佳测定效果。

    什么是侧向流免疫层析？

    侧流免疫测定系统一般是单步测定，只需要加入样品。此系统由样品垫或全血分离膜、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸收垫组成（图1）。

                               
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    图1典型的侧流测定示意图。

    样品从样品垫/全血分离膜流经结合物释放垫，并接触干燥的试剂（通常是带标记的二级抗体）。然后抗体和分析物迁移到硝酸纤维素膜螯和抗体的捕获区。任何未反应的带标记的抗体都会经过捕获区流向吸收垫。

    组件的特性—特别是芯吸率—会影响到侧流测定的准确性和可靠性，突出表明了在设计定制化测定时需要考虑每个组件。

    选择样品垫/全血分离膜

    正确选择样品垫或全血分离膜，可确保测定顺利开始。样品垫通常采用短棉绒或粘合玻璃纤维。

    短棉绒非常适合小体积样品（最多约200μL），并且芯吸率比粘合玻璃纤维慢。玻璃纤维样品垫不会引起红细胞溶血，因此适合用作全血分离膜。

    选择样品垫或全血分离膜时的其他考虑因素：

    ?稳定一致的吸收率和芯吸率：确保测试间的可重现性。

    ?低蛋白吸附：最大限度地减少分析物的损失，保持测试的灵敏度。

    ?在受控条件下制造：ISO9001认证的环境保护组件在制造过程中不受污染。

    结合物释放垫的考虑因素

    结合物释放垫对侧流免疫测定的性能至关重要。在释放垫上，结合物应该干燥，并在没有损坏或聚集的情况下储存。然后，结合物应在样品接触时迅速释放。

    选择最适合的结合物释放垫能够节省成本和时间。例如，本质亲水的释放垫在释放结合物之前不需要进行处理，从而减少试剂成本。选择具有开放结构的材料可以使结合物和样品快速渗透，进一步节省时间。

    选择结合物释放垫时要注意的特性：

    ?高水平的结合物释放：减少浪费和降低试剂成本。

    ?自然且快速的释放垫再润湿：提高长期储存后的一致性。

    选择硝酸纤维素膜

    硝酸纤维素膜对测试的灵敏度有明显影响，因此是侧流测定的一个关键部分。这些膜有一系列的芯吸率和配方可供选择。

    要获得清晰而强烈的捕获线，需要硝酸纤维膜能够结合足够蛋白并同时将背景水平降到最低以方便解读结果。

    选择硝酸纤维素膜时的考虑因素：

    ?样品粘度：高粘度的样品需要具有高芯吸率的侧流膜。

    ?测定优化：无背衬膜使膜的毛面和光面都可使用，使优化过程更简单。

    ?机械强度：有利于卷到卷的机器，背衬膜的强度更高。

    吸收垫的特性

    测试末端的吸收垫可以控制样品沿条带流动。根据样品和测定的类型选择合适的芯吸率特性，可提高测试间的一致性。确保吸收剂有足够容量也是设计免疫测定时的一个考虑因素。

    需要注意：

    ?吸收率一致性：确保测试间的可重现性。

    ?在受控环境中制造：ISO9001认证的环境最大限度地减少由于污染而导致错误结果的风险。

    ?最小的条带泄漏：防止测试结果受到污染。

    ?快速复湿：最大限度地提高测试的一致性。

    哪种最适合我的测定？

    Cytiva是一家成熟的POCT侧流免疫测定组件供应商。我们生产各种纤维素和玻璃纤维基质以及硝酸纤维素膜，质量有保障，确保结果的准确度和可重现性。

    我们的定制化服务团队可以识别您的需求，并通过个性化服务提供节省成本的定制化解决方案。我们的专家将帮助您识别和优化组件，确定最适合的技术，并提供宝贵的帮助。如需讨论您面临的任何挑战，请联系Cytiva科学支持或试试我们的Whatman 滤器选择器应用程序，以了解您是否为您的样品使用了最合适的过滤方案。